Harley Quinn, de son vrai nom Harleen Quinzel, est l'amoureuse dévouée du Joker. Ancienne gymnaste de haut niveau, elle a obtenu une bourse universitaire, puis a étudié la psychiatrie avant de décrocher un emploi à l'asile d'Arkham où elle rencontre le Joker. Fascinée par lui dès le premier instant, Harley est séduite par ses récits de traumatismes passés, qui s'avèrent mensongers mais qui la poussent à tomber éperdument amoureuse de lui. Aveuglée par cet amour, elle devient incapable de voir la réalité du psychopathe qu'est le Joker.
Harley adopte un costume d’arlequin en hommage au surnom que le Joker lui a donné et l'aide à s'évader d'Arkham. Commence alors sa carrière criminelle, marquée par une fascination pour les farces et une apparence de personnage de cirque, accompagnée de deux hyènes en guise d'animaux de compagnie.
La relation entre le Joker et Harley Quinn est un exemple frappant de toxicité. Le Joker maltraite Harley aussi bien physiquement que psychologiquement, et tente même de la tuer. Malgré cela, Harley demeure inconsciente de cette manipulation, se contentant des rares gestes d'affection qu'il lui accorde.
Dans les comics, la relation entre le Joker et Harley Quinn atteint des sommets de toxicité et de noirceur jamais montrés à l'écran. Dans The Joker: Death of the Family, écrit par Scott Snyder, le Joker kidnappe Harley et menace de lui mutiler le visage pour qu’elle reflète son image. Il joue sur ses peurs, lui faisant croire qu'il a vraiment commis l'acte atroce, alors qu'il ne lui a que mis une cagoule rouge.
Harley, aveuglée par un amour obsessionnel, idéalise le Joker et leur relation, perdant toute lucidité. Le Joker entretient cette illusion avec de petites démonstrations de tendresse, assurant ainsi sa loyauté. Cette dynamique crée une profonde insécurité chez Harley, exploitée par Batman à plusieurs reprises pour la manipuler.
Avec la sortie de Suicide Squad en 2016, les personnages du Joker et d’Harley Quinn ont gagné une nouvelle popularité. Le Joker, incarné par Jared Leto, et Harley Quinn, interprétée par Margot Robbie, ont apporté une modernité et une nouvelle dynamique à ces personnages.
Cependant, le film ne plonge pas suffisamment dans la relation complexe entre le Joker et Harley. On y voit un Joker montrant plus de compassion, bien que toujours cruel. Le personnage du Joker passe au second plan, tandis qu'Harley Quinn reflète mieux son essence de folie et d'amour désespéré pour le Joker, tout en aspirant à une vie normale.